偷偷操视频_日韩在线中文字幕视频_a级毛片免费观看在线播放_25岁高中生在线观看完整免费版_亚洲国产精品无码久久一线_美国av一区二区三区_嫩草视频在线播放_久久精品片_521人成a天堂v_av性色在线观看_欧美一区第一页_91成人在线_日本50岁熟妇XXXX_亚洲国产区男人本色VR_蜜桃视频麻豆_国产精品欧美成人_国产成人精品a视频一区_欧美不卡精品_香蕉视频网站在线观看_99资源站_蕉伊人久久_国产在线视频一区_在线a片永久免费观看_精品福利影院_欧美一区二区三区四区五区_啊啊啊国产视频_超碰人人爱人人_国产午夜性春猛交ⅹxxx_www.草草草_不卡的av在线播放

上世紀(jì)40年代，Draize試驗在化妝品眼刺激性毒理評價方面發(fā)揮了重要作用，而后隨著動物保護(hù)運(yùn)動的開展、動物實(shí)驗的“3R”原則的提出以及法規(guī)的日益重視，易操作、具有科學(xué)性的動物替代實(shí)驗也廣受歡迎。根據(jù)《化妝品功效宣稱評價規(guī)范》，宣稱溫和（無刺激）可以通過實(shí)驗室試驗、消費(fèi)者使用測試、人體功效評價試驗等方式，可以同時結(jié)合文獻(xiàn)資料或研究數(shù)據(jù)分析結(jié)果，進(jìn)行功效宣稱評價。

其中實(shí)驗室試驗有多個不同模型的測試方法，比如：

①雞胚模型，可進(jìn)行雞胚絨毛尿囊膜試驗（HET-CAM）、雞胚絨毛尿囊膜血管試驗（CAMVA）、雞胚尿囊膜臺盼藍(lán)染色試驗 （TBS-CAM）；

②體外組織模型，較為常用的有牛角膜渾濁和滲透性試驗、重建人體表皮模型體外測試；

③細(xì)胞模型，相關(guān)實(shí)驗有短時間暴露試驗（角膜細(xì)胞試驗）、熒光素漏出試驗、紅細(xì)胞溶血試驗等。

其中，短時間暴露試驗（角膜細(xì)胞試驗）在2015年通過驗證，并且是被經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織采納的眼刺激性替代方法。今天小編帶大家了解一下角膜細(xì)胞試驗。

角膜細(xì)胞試驗即使用細(xì)胞作為模型的實(shí)驗室試驗中的短時間暴露試驗。其采用的模型是SIRC細(xì)胞，是家兔眼角膜的上皮纖維細(xì)胞。實(shí)驗原理是化學(xué)物中的毒性物質(zhì)引起的角膜上皮損傷以及刺激反應(yīng)類似于細(xì)胞毒性對細(xì)胞的損傷作用。通過將化妝品原料、化學(xué)品在短時間內(nèi)直接作用于SIRC細(xì)胞上，反應(yīng)時間5min，最后通過計算細(xì)胞的相對存活率來評估受試物的刺激性。

關(guān)于角膜細(xì)胞試驗的方法有兩種，分別來自：

①《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2022的征求意見稿，第六章。

② SN/T 3084.2-2014進(jìn)出口化妝品眼刺激性試驗 第2部分：角膜細(xì)胞試驗方法。

方法有所不同，相應(yīng)的評判標(biāo)準(zhǔn)也有所不同。

①、在《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2022的征求意見稿中：

在稀釋受試物時，一個受試物同時稀釋到5%和0.05%兩個濃度，溶劑為生理鹽水，作用5min后，使用MTT法或者CCK-8法測定細(xì)胞的吸光度，計算出相應(yīng)的細(xì)胞存活率。判斷標(biāo)準(zhǔn)：

②、根據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T3084.2-2014進(jìn)出口化妝品眼刺激性試驗第2部分：角膜細(xì)胞試驗方法，在稀釋受試物時，統(tǒng)一稀釋到0.5%，溶劑使用PBS，作用5min后，使用MTT法或者CCK-8法測定細(xì)胞的吸光度，計算出相應(yīng)的細(xì)胞存活率。當(dāng)這一次實(shí)驗出現(xiàn)細(xì)胞存活率≤70%的情況，需要開始第二輪試驗，受試物濃度不變與上一次實(shí)驗相同，溶劑改用DMEM完全培養(yǎng)基，同樣方法測試，最后計算相對細(xì)胞存活率。判斷標(biāo)準(zhǔn)：

隨著“3R”原則被越來越多人所認(rèn)知以及動物實(shí)驗替代技術(shù)的成熟，體外動物替代實(shí)驗已是化妝品安全性評價發(fā)展的必然趨勢。相比動物實(shí)驗，角膜細(xì)胞試驗具有經(jīng)濟(jì)成本低、方法容易掌握、毒性終點(diǎn)易于測定、重復(fù)性好、靈敏度高、方法易標(biāo)準(zhǔn)化、材料容易獲取等優(yōu)點(diǎn)，是更適合化妝品企業(yè)內(nèi)部開展的“溫和（無刺激）”宣稱的實(shí)驗室測試方法。

復(fù)制