產(chǎn)生皺紋是皮膚衰老的特征之一。研究表明，人們提出了很多衰老學(xué)說，其中活性氧自由基學(xué)說是較多支持的學(xué)說。
人體正常生理代謝和環(huán)境影響，如紫外線照射、環(huán)境污染等，都會導(dǎo)致活性氧（ROS）的產(chǎn)生，過量的自由基會導(dǎo)致皮膚衰老等問題產(chǎn)生。減少自由基的產(chǎn)生和清除老化代謝物是減緩皮膚衰老以及皺紋產(chǎn)生的方法之一
化妝品抗皺功效測試方法分為人體法和體外法兩大類，而體外法有生物化學(xué)法、細(xì)胞法、表皮模型法、斑馬魚胚胎法等。其中生物化學(xué)法使用相對便捷、成本低、易于實(shí)現(xiàn)、速度快，可用于抗皺原料的高通量篩選。如DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、超氧陰離子自由基清除法等。
一、DPPH自由基清除法
DPPH乙醇溶液呈紫紅色，在519 nm處有最大吸收波長。當(dāng)加入自由基清除劑時，DPPH自由基被清除，溶液逐漸變淺，在519 nm 處的吸光度隨之減小。溶液顏色越淺，其吸光度值越低，自由基清除劑清除DPPH自由基的效果越好。
二、ABTS自由基清除法
ABTS與過硫酸鉀反應(yīng)生成綠色的ABTS+。具有抗氧化性的物質(zhì)可抑制ABTS+的生成，ABTS+在可見光區(qū)最大吸收峰734 nm處，測定吸光度，其光度值的大小可定量得出反應(yīng)物質(zhì)的自由基清除能力。即其吸光度值越低，具有抗氧化性的物質(zhì)清除ABTS自由基的能力越強(qiáng)。
三、超氧陰離子自由基清除法
鄰苯三酚在堿性條件下能迅速發(fā)生氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，釋放出超氧陰離子自由基（O2—），O2—進(jìn)一步加速鄰苯三酚的氧化，生成在320 nm 處有特殊吸收的中間產(chǎn)物。若在反應(yīng)體系中加入抗氧化物，可清除O2—，阻止中間產(chǎn)物的積累，使得在320 nm處的吸光度減小。
四、羥自由基清除法
水楊酸與羥自由基（·OH）反應(yīng)生成可 2,3- 二羥基苯甲酸，它在 510 nm處有最大吸收波長。利用過氧化氫（H2O2）與七水硫酸亞鐵（FeSO4·7H2O反應(yīng)生成·OH，加入具有清除自由基能力的物質(zhì)，可抑制2,3-二羥基苯甲酸生成，降低 510 nm 處的吸光度。
自由基清除劑或抗氧化劑可以提供電子、抑制氧化。通過吸收自由基的同時，細(xì)胞不受攻擊，達(dá)到清除自由基目的，減少皺紋的產(chǎn)生，從而達(dá)到減緩皮膚的衰老過程，化妝品的成品、半成品和原料可以通過上述實(shí)驗(yàn)確定其是否具有清除自由基的能力及其能力的強(qiáng)弱。
以上幾種方法可以計(jì)算樣品清除自由基的清除率，以及計(jì)算其半數(shù)清除濃度（IC50）。通過進(jìn)行不同樣品的自由基清除能力比較可知，IC50值越小，代表該樣品的清除自由基能力越強(qiáng)，從而比對出不同化妝品成品、半成品或原料清除自由基的能力。
- 參考文獻(xiàn) -
[1]用于生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用的 ROS 響應(yīng)藥物遞送系統(tǒng)[J]. 陶文輝; 何忠貴. 亞洲藥學(xué)雜志第 13 卷，第 2 期。2018. PP 101-112
[2]化妝品功效成分的透皮吸收途徑與技術(shù)[J]. 林婕,何聰芬,董銀卯,廣豐. 中國化妝品(行業(yè)). 2009(01)
[3]杏仁油及葡萄籽油清除自由基能力研究[J]. 孔浩,張繼.甘肅科技. 2008(06)
[4]高品質(zhì)茶油精制工藝進(jìn)展及其在化妝品中的應(yīng)用[J]. 張納. 廣東林業(yè)科技. 2008(04)
[5]劉科梅,聶挺,潘棟梁,胡川,陸豫,余勃. 量子化學(xué)計(jì)算研究4種黃酮類天然抗氧化物清除自由基活性的構(gòu)效關(guān)系[J].南昌大學(xué)學(xué)報(理科版),2016,40(03):250-256.
